牛胰岛素是一种蛋白质类激素,体内胰岛素是由胰岛β细胞分泌的。是肌体内唯一降低血糖的激素,也是唯一同时促进糖原、脂肪、蛋白质合成的激素。多用于动物实验。在细胞培养中,牛胰岛素作为一种重要的添加因子,凭借其调节细胞代谢、促进增殖分化等作用,广泛应用于多种细胞类型的培养体系中。其功能主要基于模拟体内胰岛素的生理作用,为细胞提供生长信号和代谢支持。
基本特性
英文名称
Insulin from bovine pancreas
CAS 11070-73-8
分子式 C254H377N65O75S6
分子量 5733.49
储存条件 -20℃,有效期2年
理化性质
外观(性状) 白色粉末
来源 牛胰腺
酶活/效价 ≥27 USP units/mg
溶解性 10mg/mL PH=2 稀盐酸溶液
核心作用机制
牛胰岛素在细胞培养中的作用与其生理功能一致,主要通过以下途径影响细胞:
激活胰岛素受体(IR):与细胞表面的胰岛素受体结合,启动下游信号通路(如 PI3K-Akt、MAPK/ERK),调控细胞增殖、存活及代谢相关基因的表达。
调节物质转运:促进葡萄糖、氨基酸等营养物质通过细胞膜进入细胞(如激活葡萄糖转运蛋白 GLUT4),为细胞提供能量和合成原料。
维持细胞表型:抑制细胞凋亡,促进特定细胞类型(如脂肪细胞、肌细胞)的功能维持或分化。
使用说明
使用注意事项
浓度范围:常规使用浓度为 1-10 μg/mL(约 0.17-1.7 μM),具体需根据细胞类型调整(如干细胞培养常用 5 μg/mL,脂肪细胞分化可能需更高浓度)。
溶解与储存:通常用稀酸(如 0.1 M HCl)溶解为储备液(1-10 mg/mL),过滤除菌后分装,-20℃冻存;工作液需新鲜配制,避免反复冻融。
协同作用:常与其他因子联合使用(如 ITS 复合物、生长因子),其效果受培养基成分、pH、温度等因素影响,需通过预实验优化。
重要提示
产品用途:仅供研究使用,不适用于人或动物的体外诊断与治疗。
由于实验受多种因素影响具有不确定性,本说明书操作说明仅供参考,z终解释权归本公司所有。
数据及应用
主要应用场景
特定细胞类型的增殖与存活
干细胞培养:在间充质干细胞(MSC)、胚胎干细胞(ESC)等培养中,牛胰岛素常作为血清替代物(如无血清培养基)的成分之一,与转铁蛋白、硒等组成 “ITS” 复合物(Insulin-Transferrin-Selenium),协同促进干细胞增殖并维持其未分化状态。
上皮细胞培养:如乳腺上皮细胞、肾小管上皮细胞,胰岛素可通过调节细胞代谢增强其贴壁能力和存活时间,减少因营养利用不足导致的凋亡。
神经细胞培养:在神经元或神经胶质细胞培养中,胰岛素可促进细胞对葡萄糖的摄取,维持能量供应,同时通过信号通路保护细胞免受氧化应激损伤。
诱导细胞分化
脂肪细胞分化:在 3T3-L1 前脂肪细胞向成熟脂肪细胞分化的模型中,牛胰岛素是关键诱导因子之一(常与地塞米松、IBMX 联合使用),可激活脂肪合成相关基因(如 PPARγ、C/EBPα),促进脂滴形成和甘油三酯积累。
肌细胞分化:在成肌细胞(如 C2C12)分化为肌管细胞的过程中,胰岛素通过调控肌动蛋白、肌球蛋白等结构蛋白的合成,加速肌纤维融合和成熟。
肝细胞功能维持:在原代肝细胞培养中,添加胰岛素可促进糖原合成,维持肝细胞的代谢功能(如尿素合成、药物代谢酶活性),延长细胞体外存活时间。
无血清或低血清培养体系优化
传统细胞培养依赖血清提供营养和生长因子,但血清成分复杂、批次差异大,可能干扰实验结果。牛胰岛素因成分明确、纯度高,常被用于无血清或化学成分限定培养基(CDM)的配方中,例如:
与白蛋白、转铁蛋白、胆固醇等组合,替代血清中的激素和营养转运功能,用于淋巴细胞、杂交瘤细胞等的无血清培养,提高实验重复性。
在昆虫细胞、CHO 细胞等工程细胞培养中,胰岛素可调节细胞代谢效率,提升重组蛋白表达量。
代谢相关研究模型
用于构建胰岛素敏感性或抵抗模型:通过调节牛胰岛素浓度,研究细胞对胰岛素的响应(如葡萄糖摄取率变化),模拟糖尿病或代谢综合征的细胞状态。
探究细胞能量代谢通路:结合同位素标记或代谢组学分析,研究胰岛素如何调控细胞的糖酵解、氧化磷酸化等过程。