青霉素-链霉素双抗溶液(Penicillin-Streptomycin Solution,简称“双抗”)
本溶液内含 10,000 单位/mL 青霉素和 10,000 μg/mL 链霉素。抗生素——青霉素和链霉素对革兰阳性细菌和革兰阴性细菌具有有效的联合抗菌作用,可用于防止细胞培养受到细菌污染。青霉素起初是从真菌 青霉菌中提纯制成,其作用机制为直接干扰细菌细胞壁的合成以及间接通过触发酶释放来进一步改变细胞壁。链霉素起初是从灰色链霉菌中提纯制成。其作用机制为与细菌核糖体的 30S 亚单位结合,进而抑制蛋白合成,导致敏感细菌死亡。
功能定位
主要用途:预防细胞培养中的细菌污染(革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌)。
非灭菌替代品:需配合无菌操作技术使用,不可替代培养基过滤或高压灭菌。
双组分协同抑菌原理
| 抗生素 | 作用靶点 | 抑菌谱 | 作用机制 |
| 青霉素(Penicillin) | 细菌细胞壁肽聚糖 | 革兰氏阳性菌(如葡萄球菌、链球菌) | 抑制转肽酶活性,阻断细胞壁合成 → 细菌裂解 |
| 链霉素(Streptomycin) | 细菌核糖体30S亚基 | 革兰氏阴性菌(如大肠杆菌、沙门氏菌) | 干扰蛋白质合成,导致错误氨基酸插入 |
协同优势:青霉素破坏细胞壁后,链霉素更易进入菌体,增强对混合感染的防控效果。
工作浓度
常规添加量:按培养基体积的 1%(如1 mL双抗溶液 + 99 mL培养基)。
特殊场景调整:
原代细胞培养:可降至 0.5%–0.8%(减少毒性)。
高污染风险样本(如组织块):最高不超过 2%。
使用操作指南(添加流程)
1)解冻双抗溶液(4℃过夜或室温水浴),涡旋混匀。
2)在无菌配制培养基后加入,终浓度1%。
3. 充分混匀培养基,避免局部浓度过高。
注意事项
1. 毒性风险控制
细胞毒性:过高浓度(>2%)可能抑制细胞增殖(尤其敏感细胞如神经元、干细胞)。
产品仅供研究使用,不适用于人或动物的体外诊断与治疗。
由于实验受多种因素影响具有不确定性,以上说明仅供参考,Z终解释权归本公司所有。
解决方案:首次使用需梯度测试(0.5%、1%、1.5%),观察细胞状态72小时。
代谢干扰:链霉素可轻度抑制线粒体功能,长期使用建议周期性停用(如传代2次后停1次)。
2. 污染处理局限性
仅限预防:对已存在的污染无效(污染后需丢弃培养基,彻底消毒)。
耐药菌风险:长期使用可能筛选出耐药菌株(如β-内酰胺酶阳性菌),需定期更换抗生素组合。
3. 稳定性与储存
储存条件:
未开封:–20℃冷冻(有效期2年)。
开封后:4℃避光保存(有效期1个月),避免反复冻融。
活性失效标志:溶液变黄或浑浊(立即停用)。
4支原体污染
双抗对支原体无效(需改用支原体清除试剂)。
真菌/酵母污染:需添加 两性霉素B(Amphotericin B) 或 氟康唑(Fluconazole)。
病毒污染:抗生素无效,需废弃培养体系。
产品仅供研究使用,不适用于人或动物的体外诊断与治疗。
由于实验受多种因素影响具有不确定性,以上说明仅供参考,最终解释权归本公司所有。
适用
原代细胞分离培养(如皮肤成纤维细胞、免疫细胞)。
传代细胞系维持培养(如HEK293、HeLa)。
细胞冻存液添加(终浓度1%,防止冻存过程污染)。