昆虫细胞无血清培养基(Insect Cells Serum free medium SFM-IC)是一种专为昆虫细胞(如Sf9、Sf21、High Five等)设计的培养基,不含血清或其他动物源成分,适用于昆虫细胞悬浮培养、蛋白表达、病毒生产等应用。相较于传统含血清培养基,无血清培养基具有:批次稳定性高、减少污染风险、提高蛋白表达效率等优势。
特点:
无血清 & 无动物源成分
避免血清批次差异,提高实验可重复性。
降低外源病原体(如支原体、病毒)污染风险。
支持高密度细胞生长
优化配方可支持Sf9细胞密度达 1.0×10⁷ cells/mL,High Five细胞达 5-7×10⁶ cells/mL。
适用于杆状病毒表达系统(BEVS),提高重组蛋白产量。
成分明确 & 可扩展性
含必需氨基酸、维生素、脂类前体等,满足昆虫细胞生长需求。
适用于生物反应器大规模培养,便于工业化生产。
使用方法
细胞适应(驯化)
直接适应:离心后更换为100%无血清培养基(适用于状态良好的细胞)。
渐进适应:
1. 初始使用 50%原培养基 + 50%无血清培养基混合培养。
2. 逐步提高无血清比例(75%、100%),每代监测细胞活率(需≥90%)。
悬浮培养参数
参数 推荐条件
温度 27°C ± 0.5°C
摇床转速 110-130 rpm(TPP管)或60-95 rpm(转瓶)
CO₂ 无需控制(部分产品需避免5% CO₂环境)
接种密度 Sf9: 1.0×10⁶ cells/mL;High Five: 0.5×10⁶ cells/mL
细胞冻存
冻存密度:
含血清冻存:15-20×10⁶ cells/mL(推荐40%培养基+50%FBS+10%DMSO)。
无血清冻存:30-40×10⁶ cells/mL(推荐45%培养基+45%上清+10%DMSO)。
程序降温:使用冻存盒(-80°C 24h后转移至液氮)。
注意事项
细胞状态监测:
定期检测活率(≥90%),避免过度生长导致死亡细胞增多。
出现细胞聚集时,可低速离心(100g, 5min)去除碎片。
病毒表达优化:
稳定传代3代后再感染杆状病毒,以提高蛋白产量。
重要提示
产品用途:仅供研究使用,不适用于人或动物的体外诊断与治疗。
由于实验受多种因素影响具有不确定性,本说明书操作说明仅供参考,z终解释权归本公司所有。